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液相色譜柱在使用前應(yīng)了解哪些內(nèi)容呢?

點(diǎn)擊次數(shù):2100 發(fā)布時間:2020-12-15
液相色譜柱在使用前應(yīng)了解哪些內(nèi)容呢? 
色譜柱在使用前,進(jìn)行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。 
1、樣品的前處理: 
a、使用流動相溶解樣品。 
b、使用予處理柱除去樣品中的性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。 
c、使用0.45µm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。 
2、流動相的配制: 
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點(diǎn): 
a、流動相對樣品具有一定的溶解能力,樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 
b、流動相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(情況除外)。 
c、流動相的黏度要盡量小,以便在使用較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降,延長液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提溫度的方法降低流動相的黏度)。 
d、流動相的物化性質(zhì)要與使用的檢測器相適應(yīng)。如使用UV檢測器,*好使用對紫外吸收較低的溶劑配制。 
e、流動相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。 
f、在流動相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動相中的微量氣體既有利于檢測,還可以防止流動相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。 
3、流動相流速的選擇: 
因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱,要追求柱效,*好使用*佳流速。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。 

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