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論液相色譜的溶劑效應(yīng)

點(diǎn)擊次數(shù):2452 發(fā)布時(shí)間:2018-07-30
  論液相色譜的溶劑效應(yīng)
  一 通常概念及其局限
  目前*的溶劑效應(yīng)的理解是樣品溶劑度大于流動(dòng)相時(shí)造成色譜峰變形的現(xiàn)象。比如100%純乙腈溶解樣品,注入流動(dòng)相為乙腈—水(18:82)的反相系統(tǒng)中,會(huì)造成峰分叉或拖尾的現(xiàn)象。但是這種概念不能解釋其他由于所選稀釋劑導(dǎo)致的峰變形現(xiàn)象,如溶出樣品,在pH6.8溶出介質(zhì)中取出的樣品注入某些緩沖鹽—有機(jī)相系統(tǒng)中保留時(shí)間不穩(wěn)定及色譜峰變形。
  二 概念擴(kuò)展與詳述
  鑒于許多由稀釋劑導(dǎo)致的色譜峰變形的現(xiàn)象不能用目前的溶劑效應(yīng)解釋,我覺得有必要將溶劑效應(yīng)的概念延伸。溶劑效應(yīng),顧名思義,就是由于樣品中某些組分在稀釋劑與流動(dòng)相所處的狀態(tài)的較大差異導(dǎo)致的色譜行為表現(xiàn)異常的情況。
  1 洗脫能力的差異
  目前一般意義上的理解說的就是這種情況,不再贅述。
  2 電離狀態(tài)的差異
  藥物活性成分一部分都是能離子化的樣品,原料藥都是成鹽狀態(tài),如鹽酸達(dá)卡他韋,帕瑞昔布鈉等。此類樣品它們都會(huì)電離,且基本上都不是*電離,一部分是離子化狀態(tài),一部分是分子狀態(tài),兩種不同的狀態(tài)在流動(dòng)相和固定相之間的分配是不一樣的。
  在反相系統(tǒng)中,分子狀態(tài)和固定相結(jié)合的更緊密,保留更,離子狀態(tài)更親和于流動(dòng)相,保留較弱。如果樣品在稀釋劑中的電離狀態(tài)和流動(dòng)相的電離狀態(tài)有非常大的差異,例如上文提到的溶出樣品,樣品的稀釋劑是pH6.8溶出介質(zhì),緩沖鹽是10Mm/l的磷酸鹽溶液(pH3.0),這就可能發(fā)生保留時(shí)間不穩(wěn)定及色譜峰變形的現(xiàn)象。樣品假如是堿性樣品,它在pH6.8溶出介質(zhì)中大多未電離,而在磷酸鹽溶液(pH3.0)有一部分是電離狀態(tài),在樣品溶液和流動(dòng)相接觸混合的過程中,需要一段時(shí)間將電離狀態(tài)緩沖至流動(dòng)相所處的狀態(tài)。這個(gè)時(shí)間如果較長,就會(huì)導(dǎo)致色譜行為的異常。
  從以上的分析,應(yīng)該可以看出,解決類似問題的辦法有三個(gè),樣品溶液用流動(dòng)相稀釋,減少進(jìn)樣量,或者增流動(dòng)相緩沖能力。增加緩沖能力的做法請(qǐng)參見我的《方法開發(fā)緩沖鹽使用指導(dǎo)原則》?
  3 溶解性的差異
  做與參比制劑的溶出曲線對(duì)比試驗(yàn)中,經(jīng)常會(huì)在溶出介質(zhì)中加入表面活性劑,我想有多人就會(huì)發(fā)現(xiàn)樣品的保留時(shí)間飄忽不定。其實(shí)根本原因和前二者差不多,都是由于樣品在稀釋劑中與固定相的分配系數(shù)與流動(dòng)相與固定相的分配系數(shù)差異較大導(dǎo)致。流動(dòng)相在將樣品溶液稀釋至與自身能力相差不大的情況需要一定的時(shí)間,該時(shí)間的長短在色譜行為上會(huì)有體現(xiàn)。目前可行的解決辦法有兩個(gè),在流動(dòng)相中加入同樣的表面活性劑,或者提有機(jī)相比例。
  4 總結(jié)
  還要其他方面的差異,由于本人精力及經(jīng)歷的限制,就不一一列舉。但是都可以參照上述的情況解釋并且尋找解決辦法。

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